本发明涉及一种1,4-二酰基-3,6-二苯基-1,4-二氢均四嗪类化合物及其制备方法和应用，属于药物合成技术领域。本发明的化合物通过在碱性催化剂的作用下，使式Ⅱ化合物（X为卤素，R为C₁-C₅的烷基或苄基）和式Ⅲ化合物进行酰化反应得到1,4-二酰基-3,6-二苯基-1,4-二氢均四嗪类化合物。本发明的化合物具有较高有生物活性，尤其对肿瘤细胞具有较高的抑制作用，实现抗肿瘤的效果，能够用于抗肿瘤药物；且本方法工艺过程简单、一步反应完成，条件温和，易于操作，且产品的收率较高。