本发明公开了一种离子诱导制备柞蚕丝素蛋白纳米颗粒的方法。在柞蚕丝素蛋白溶液中，加入阳离子诱导柞蚕丝素蛋白形成纳米微球。本发明制备环境为中性和常温常压状态，并避免了有机溶解的使用，提高了材料的利用度，产量可达到90%以上；得到的微球粒径分布均匀，尺寸达到纳米级别，且形成的微球能够保持柞蚕丝素蛋白的生物相容性，对人体无毒、无害、无免疫原性；同时，本发明提供的纳米颗粒保持了柞蚕丝素蛋白的RGD序列，能够促进细胞对于微球的识别，提高药物的靶向性，可广泛用于生物医学测量，药物或化妆品传送，微流体采样等领域。