本发明公开了一种具有抑制肝癌细胞活性的塔黄提取物，该提取物至少含有如下活性成分：大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、大黄酚葡萄糖苷、大黄素葡萄糖苷以及1,8-二羟基-2,3-甲氧基-6-甲基蒽醌。本发明还公开了上述塔黄提取物在制备抑制SMMC-7721和HEPG2肝癌细胞活性药物上的应用。本发明的塔黄提取物对SMMC-7721肝癌细胞和HEPG2肝癌细胞活性具有极好的抑制作用，将该塔黄提取物作为活性成分，与适宜的赋形剂相结合，可制成各种药物制剂，用于抑制肝癌细胞活性，因此本发明的塔黄提取物具有广阔的应用前景。