本发明公开了强心苷化合物12β-hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，该强心苷化合物12β-hydroxycalotropin具有显著的抗肿瘤活性，可作为治疗肿瘤的先导化合物；同时，本发明提供的强心苷化合物12β-hydroxycalotropin的提取分离方法简单易行，成本低，效率和得率高，提取物质量好。