本发明提供了一种检测细胞内Notch信号通路的试剂、PCR检测方法及其应用，本发明所述检测试剂包括检测ADAM10基因、ADAM17基因、AES基因、CBL基因、CCND1基因、CD44基因等PCR反应引物以及相应的内参调控基因GAPDH、ACTB、B2M的引物。本发明提供了检测NOTCH信号通路核心分子变化的试剂，借助于所述检测试剂可以通过实时荧光定量PCR在转录水平快速检测出与NOTCH通路相关的基因，在此基础上分析研究肿瘤NOTCH信号通路的核心分子及作用机理，从而快速准确的找到肿瘤相关药物的NOTCH调节信号通路，为抗癌药物筛选、新靶向药物的机制探讨等提供了有力的工具。