天然药物制剂中藁本内酯的测定方法，以藁本内酯的水解产物2-（1-戊酮）-1，5-环已二烯甲酸为对照品，测定天然药物制剂中藁本内酯的含量，使藁本内酯制剂在含有碱金属氢氧化物的乙腈水溶液中充分水解，再利用高效液相色谱，测定样品中的2-（1-戊酮）-1，5-环已二烯甲酸含量，再按照摩尔比1:1的比例换算成藁本内酯的含量。本发明的方法稳定性好、成本低廉，能够简便、准确地测定天然药物制剂中藁本内酯的含量。