本发明公开了一种动物养殖用乳酸菌液的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将发酵培养基加热至95—100℃灭菌5—20分钟后，冷却至38℃以下；2）将同型乳酸发酵菌的种子液按1:（2—50）的体积比接种至经步骤1）冷却的所述发酵培养基进行液体厌氧发酵；3）收集经步骤2）所述液体厌氧发酵的发酵液，获得所述动物养殖用乳酸菌液。使用本发明所提供的方法制备动物养殖用乳酸菌液的优点如下：对设备的要求低，生产成本低，获得的乳酸菌液质量稳定，有利于乳酸菌液在养殖业中的推广应用，提高动物生产性能的同时可提高动物源性食品的安全。