本发明公开了一种生产柠檬酸的方法，包括如下步骤：a、在发酵罐中加入发酵培养基，所述发酵培养基包括以下重量份的物质：葡萄糖母液7-20%、大豆蛋白水解物5-30‰、MnSO₄2-4‰、(NH)₂SO₄1-10%、余量为水；b、在上述发酵培养基中接入发酵种子培养基，进行发酵培养得到柠檬酸。本发明采用上述技术方案，采用葡萄糖母液为原料代替公知的柠檬酸发酵培养基中的原料葡萄糖，对柠檬发酵培养基的成分，性能，功效等几乎没有任何影响，与糖液发酵生产的柠檬酸比较更有品质保障，可明显降低原料成本，还可以合理综合利用玉米深加工过程的副产品资源，减少环境污染和污水处理费用，缓解玉米综合加工中污水处理的压力。