本发明公开了一种城市污水厂进水毒性监测方法。连续采集城市污水厂生化池混合液与沉砂池进水，两者按照一定的比例混合，并连续测定其呼吸速率，通过呼吸速率的变化判定进水对生化池活性污泥的毒性及抑制程度。本发明能够实现在线连续对进水毒性进行监测、真实反映进水对生化池活性污泥的抑制情况、维护较少、操作简便，能够应用于实际污水处理厂。