本发明属于生物医药领域，涉及5-FU耐药性检测试剂及5-FU耐药逆转剂，更具体地说，涉及MSK1相关制剂在制备5-FU耐药性检测试剂及5-FU耐药逆转剂方面的应用。5-FU药物耐药性/敏感性与细胞MSK1表达量之间具有显著的关联性。当细胞低表达MSK1时，对5-FU药物的敏感性高；反之，当细胞高表达MSK1时，对5-FU药物的敏感性降低。本发明首次提供了MSK1表达量检测试剂或测试系统在制备5-FU药物耐药性/敏感性检测试剂中的应用；以及MSK1表达抑制剂在制备5-FU药物增敏剂/耐药逆转剂方面的应用。