本发明属医药领域，涉及3β,20(S),21-三羟基达玛烷-24-烯在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其是3β,20(S),21-三羟基达玛烷-24-烯在制备肿瘤药物耐药逆转剂中的用途。本发明3β,20(S),21-三羟基达玛烷-24-烯是天然产物，经试验证实具有逆转肿瘤细胞多药耐药的作用，可以作为多药耐药逆转剂；也具有增加多药耐药细胞对抗肿瘤药物敏感性的作用，可以作为增敏剂。本发明还提供了抗肿瘤药物和3β,20(S),21-三羟基达玛烷-24-烯联合使用的药物组合物。本发明的小分子化合物作为新的抗肿瘤药物或者其辅助成分进行开发，抑瘤效果明显，绿色环保，将为治疗和治愈肿瘤提供了一种新的途径和手段。