本发明涉及一种牛角瓜组织培养的方法，属植物组织培养领域，包括如下步骤：培养基配制、外植体选取与消毒、种子萌发、不定芽诱导及增殖、生根诱导、组培苗驯化及移栽。基本培养基为MS培养基，蔗糖25～30g/L，琼脂粉8～9g/L，PVP 0.1～0.5g/L，培养基pH为5.6～5.8；种子萌发培养基为MS或1/2MS；不定芽诱导培养基为MS+6-BA3.0～5.0mg/L+NAA0.05～0.2mg/L+PVP 0.1～0.5g/L；不定芽增殖培养基为MS+6-BA1.0～3.0mg/L+NAA0.05～0.2mg/L+PVP 0.1～0.5g/L；生根培养基为MS+IBA 0.01～0.5mg/L+PVP0.1～0.5g/L或1/2MS+IBA0.01～0.5mg/L+PVP 0.1～0.5g/L。培养条件为25±2℃，12～16h/d，40～60μ·mol·m^-2·s^-1。本发明的优点：建立的牛角瓜组培快繁技术体系种苗繁殖速度快，健壮均匀，变异少，移栽成活率高，适合优良牛角瓜品种种苗规模化生产。