本发明“高效RNA干扰联合Bt基因双重防治番茄根结线虫的方法”，属于植物病虫防治领域。以转入有RNA干扰载体pCAGC1341-TGPM01RNAi的转基因番茄为宿主植物转化外植体，转入表达Bt-Cry6A晶体蛋白的载体，获得双重抗根结线虫的转基因番茄品种。本发明还提供了转基因的优化方法。本发明合成的基因是对密码子进行优化的。将优化后的编码Bt-Cry6A晶体蛋白的人工基因以及转有该基因的番茄品种，显示比转化单一基因的抗线虫效果好。