本发明涉及一种美人蕉茎尖组织培养的方法，包括如下步骤：培养基的配制、外植体的选取与消毒、茎尖剥离、茎尖培养、不定芽诱导及增值、不定芽生根诱导、组培苗驯化及移栽。基本培养基选用MS培养基，蔗糖25～30g/L，琼脂粉8～9g/L，培养基pH5.7～5.8；茎尖培养用培养基为MS+6-BA0.1～0.5mg/L+NAA0.05～0.2mg/L+L-脯氨酸50～200mg/L；不定芽诱导及增殖培养基为MS+6-BA2.0～6.0mg/L+CaCl₂50～800mg/L；生根培养基为MS+IBA0～0.5mg/L或1/2MS+IBA0～0.5mg/L。本发明的优点：建立的美人蕉组培快繁技术体系种苗繁殖速度快，健壮均匀，移栽成活率高，适合优良美人蕉种苗脱毒及规模化生产。