一种大苞鞘石斛兰的无菌播种和组织培养的方法，本方法选取生长健壮的大苞鞘石斛母株，于开花时进行人工授粉，将授粉后发育至基本成熟而未开裂时的果实作为外植体，并经过无菌播种、分化培养、增殖培养、生根培养、壮苗培养基试管苗移栽等繁殖步骤。本发明具有种子萌发率高、成苗快、种苗品质好等特点，能在短期内获得大量的试管苗，成苗的移栽成活率90%以上。能为大苞鞘石斛的种苗生产及资源保护提供一条有效的途径。