本发明公布了山葵种子催芽茎尖灭菌初代培养方法，包括（A）催芽、（B）选材、（C）清洗：将步骤（B）整理好的芽用洗衣粉液清洗后，用纱布包裹后，利用自来水持续冲洗2小时，再用1%浓度的消洗灵溶液浸泡30分钟，最后用无菌吸潮纸基本吸干水分；（D）灭菌：将经步骤（C）制得的山葵芽茎尖利用70%体积浓度的酒精浸泡28～32秒，然后利用0.2%升汞进行消毒处理，最后用无菌水清洗5次；（E）初代培育。本发明通过山葵种子催芽，切取茎尖培养，获得了85%的无菌成苗率，并经过后续扩大试验的验证，这是山葵外植体初代培养的一个极大突破。