本发明涉及一种小叶矮生型广玉兰的嫩茎段离体培养方法，属于植物组织培养技术领域。所述的方法包括以下步骤：1)拟接种材料的选择与预处理，2）外植体的消毒，3）无菌系的建立，4）丛生芽的诱导与增殖培养，5）壮苗与生根培养，6）试管苗的炼苗与移栽。本发明具有的有益效果：丛生芽的诱导率达到90%以上，壮苗生根培养后的生根率达到96%以上，存活率可达96%以上，繁殖速度快、繁殖率高、脱病毒及提纯复壮等优点，克服现有技术中繁殖系数低、周期长、受季节限制等缺陷，可在短时间内工厂化生产优质种苗以满足城乡绿化之需。以一个茎段为例，一年内可工厂化快速繁殖种苗上万株，且质量优异。