本发明公开了一种大薯脱毒组培苗的培养方法，包括如下步骤：(1)植物外植体的选择及无菌处理；(2)丛生芽诱导培养；(3)增殖培养；(4)壮苗培养；(5)生根培养。所述培养所用培养基均为特定的培养基。本发明的大薯脱毒组培苗的培养方法，优点在于：无菌条件下茎尖剥离，选用配方合理的培养基，在特定的培养条件下，培养出的大薯组培苗可脱除病毒，生根率高，移栽成活率高，可有效恢复优良品种的特性。通过本发明方法生产大薯脱毒种苗，产量大，成本低，周期短，可快速有效地繁殖大薯脱毒组培苗。