本发明提供了一种用红豆杉愈伤组织产生紫杉醇的方法，以‘曼地亚’红豆杉叶片为外植体，经消毒、灭菌、接种，培养一段时间后，在叶片伤口处产生愈伤组织，继续对愈伤组织进行增殖培养。取红豆杉叶片愈伤组织研磨并用乙酸乙酯超声萃取3次，收集有机相，过滤后用旋转蒸发器减压蒸馏，溶解于少量甲醇中，得到含有紫杉醇的甲醇溶液。本发明应用组织培养技术克服红豆杉植株生长缓慢、紫杉醇化学合成复杂的问题。所用基本培养基以SH培养基为基础，辅以2，4-二氯苯氧乙酸、L-脯氨酸、蔗糖等成分；为进行工厂化细胞生产紫杉醇提供基础，环境友好，原料丰富，可很好缓解市场对紫杉醇供应缺口大的问题。