本发明公开了一种湖州百合组培快繁方法，包括：将洗净的湖州百合的鳞片置于200~300mg/L甲基托布津中震荡0.3~1h后，于70~75%酒精中浸泡20~30s，再浸入质量体积浓度为0.1%~0.2%升汞中15~25min，冲洗干净；将冲洗干净的鳞片接至诱导培养基进行诱导培养；诱导出芽后，转移到增殖培养基进行增殖培养，获得丛生芽；将丛生芽接至壮球生根培养基，获得无菌苗。本发明的方法有效解决了湖州百合外植体在初代培养过程中易出现真菌、细菌污染的情况，将污染率控制在25%以下，此外死亡率也较低，且建立了一整套完整的初代、继代、壮球、生根培养过程，具有高诱导率及增殖倍数。