鸟巢蕨诱导绿色小球高频率植株再生方法，属于植物培养方法技术领域。本发明以鸟巢蕨无菌苗的顶生短茎为外植体材料，在附加苯基脲类细胞分裂素CPPU1.5~2.5mg/L和吲哚丁酸IBA0.1mg/L的MS改良培养基上诱导产生绿色小球，绿色小球的诱导频率达100%。在添加CPPU1.0~1.5mg/L和IBA0.1mg/L的MS改良培养基上进行绿色小球增殖，绿色小球每代增殖系数为5。在附加CPPU0.2~0.5mg/L和IBA0.1mg/L的MS改良培养基上绿色小球萌发形成幼苗。幼苗在附加IBA0.2~0.4mg/L的MS改良培养基上发育成具有根、茎、叶的完整小植株，成株率达95%以上。本方法适用于鸟巢蕨试管苗工厂化生产。