本发明公开了一种红豆杉叶片愈伤组织的诱导和继代培养的方法。即以当年生南方红豆杉的幼嫩叶片为外植体，消毒后接种于特定的诱导培养基中，在20-22℃条件下暗培养20天后，选取疏松、淡黄色的愈伤组织，转入特定的继代培养基中，在20-22℃条件下进行继代培养20天后即得到红豆杉叶片的愈伤组织。本发明的一种红豆杉叶片愈伤组织的诱导和继代培养的方法，具有诱导率高、出愈时间短、生长速度快、污染率低等特点，并解决运用植物细胞培养技术对红豆杉愈伤组织进行大规模培养的问题。