本发明公开了一种富硒、富铬铁皮石斛原球茎的培养方法，包括以铁皮石斛种子、茎尖或根尖为外植体进行原球茎的诱导、原球茎增殖培养，其增殖培养基组成是在每1L的1/2MS培养基中含椰子汁100mL，NAA0.2mg，KT1.0mg，蔗糖30g，亚硒酸钠0.3mg，三氯化铬0.35mg，琼脂8g，pH5.6～5.8；选取诱导培养30～40d、种胚萌发、芝麻粒大小的原球茎，将其转接于增殖培养基中，每瓶约10颗；于25℃，1500～2000lux光照强度，光照时间1～16h/d的条件下培养。本发明的有益效果为：1、整个过程均在温室条件下进行，不受地区、季节及气候限制，无污染；2、培养过程工艺简单、易操作、周期短、后续投资少；3、铁皮石斛原球茎增殖能力强、产量高、对微量元素富集率高。