本发明公开了葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成带芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式；S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为24～26℃的培养室内培养，一周后，带芽茎段长成完整植株。本发明的有益效果是：实现了葡萄带芽茎段同时增殖及生根的一步法快繁，仅需一种培养基，同时进行繁殖、壮苗、生根培养，组培苗生长健壮，生产成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，且繁殖系数高，繁殖周期短；降低了操作难度，利于提高培养效率。