本发明属于植物组织培养领域，提供了一种用于研究李砧玛丽安娜无性砧组培的方法，该方法根据植物叶片再生原理，首先准备越冬的枝条，以越冬的休眠枝条的叶片为外植体，接种至培养基上进行愈伤组织诱导，对培养基进行设计筛选，然后对生根培养基进行研究筛选，从而获得了诱导培养基及生根培养基的最佳的激素配方，方法简单实用，解决了采用常规的繁殖手段时，苗木质量不能保证的问题，实现了对李砧玛丽安娜无性砧组培技术系统地研究，为砧木的工厂化、标准化和规模化生产奠定了基础。