本发明涉及一种大叶藻愈伤组织的诱导方法，是以大叶藻的胚为外植体，将无菌胚从已表面消毒的种子或果实中取出，接种到愈伤组织诱导培养基上，在15-25℃、黑暗条件进行诱导培养，每半月转接一次，培养近20-30d时，可见子叶发出，随子叶的发出可见子叶发出处膨大，约50d后形成愈伤组织。诱导培养基是以MS、1/2MS培养基为基础培养基、并添加有机添加物、碳源、生长素和海盐的固体培养基。本发明的方法可快速有效地诱导出大叶藻的愈伤组织，为大叶藻无菌组培苗再生和组培快速繁殖体系的建立提供了重要的技术支撑，也为海草组织培养的成功奠定了基础。