本发明公开了一种杜仲离体快速繁殖的方法，其特征在于，包括以下步骤：将外植体放置于含有生长素或者类生长素的MS培养基上培养形成不定根；将不定根切成切段，接种在含有植物生长调节剂的MS培养基上形成不定芽；将形成成熟叶片的不定芽培养在含有类生长素的1/2MS培养基上诱导生根形成具有根及功能叶片的试管苗；驯化试管苗；移栽定植。本发明的有益之处在于：利用植物离体培养技术，以杜仲离体培养的子叶、愈伤组织等多种外植体所形成的不定根为材料，经过诱导高效获得不定芽，生根后形成试管苗移栽大田获得无性繁殖系；该方法提供了一种杜仲离体快速繁殖的新途径，不仅繁殖速度快、效率高，而且杜仲离体材料利用效率得到了提高。