本发明公开一种草莓组织培养方法，属于农业生物组织培养技术领域，其包括以下步骤：步骤一、选择外植体：于5~6月份晴天的下午，取健壮、无病草莓植株刚抽出的匍匐茎茎尖，大小为0.3~0.4mm，作为组织培养的外植体茎尖；步骤二、准备培养基：1）分化培养基；2）继代培固体养基；3）诱导生根培固体养基；步骤三、灭菌；步骤四、接种；步骤五、组培苗移栽。本发明的草莓组织培养方法，通过选择升汞作为灭菌剂，杀菌能力较强，并且时间容易控制把握；通过选择不定根直接生自茎基且多而粗壮，3片叶以上且大而深绿的生根苗，使得成活率普遍较高；本方法不仅整体的操作过程较为简单，实施起来较容易，而且能够快速大量繁殖草莓脱毒苗，具备很好的实用性。