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一种高效的木豆毛状根培养体系建立方法
编号:S000005491 刷新日期: 有效日期至:2021-01-03 浏览:2301 对接邀请:0
意向价格: 面议
所在区域:中国 - 黑龙江 技术领域:医疗卫生 - 生物医药
转让类型:科技服务
专利类型:发明专利 技术成熟度:可以量产
供应描述
本发明提供一种利用木豆无菌苗叶片进行外植体转化,建立木豆毛状根培养体系方法。本发明采用叶片为外植体,建立毛状根培养体系:叶片在1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L的培养基上预培养两天后进行菌液侵染,菌液浓度OD600为0.6-0.8,侵染5-10min后转入1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L培养基上共培养3天,然后转入抑菌培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+400mg/L羧苄青霉素,约一周左右便可形成毛状根。PCR检测证明外源基因已经转入到木豆毛状根中,转化率为60%。转化后毛状根在无激素培养基上生长速度非常快,一个月能增殖7-8倍。次生代谢产物含量高,芹菜素和染料木素含量分别为0.58mg/g(DW)和1.32mg/g(DW),显著高于实生苗根中含量。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得木豆毛状根方法,可用于规模化培养木豆毛状根来提取有价值次生代谢产物,具有很好的应用前景。
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机构地址:No.490, S.Ning'an Str., Yinchuan,Ningxia 查看地图
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