本发明涉及橡胶树林段树根离体诱导新生无菌根的方法，是选取橡胶树林段的幼嫩树根，直径为1.2～1.5mm，切成长度为8～10mm的根段作为外植体材料，接种于无菌根诱导培养基暗培养，培养温度在24℃～30℃之间，暗培养25～40天，直接诱导出新根。所述的无菌根诱导培养基为CaCl2400～450mg/L、KH₂PO₄500～520mg/L、MnSO₄4H₂O40～50mg/L、MgSO₄7H₂O600～620mg/L；并添加6-BA0.5～2.5mg/L、KT0.8～1.0mg/L、NAA1.0～3.0mg/L、2，4-D5.0～5.5mg/L、Phytagel2～3g/L、蔗糖50～90g/L、椰子水40～90ml/L。本发明以橡胶树林段树根作为外植体，通过组织培养诱导无菌根，获得橡胶树再生幼嫩的新生无菌根，材料来源方便，工艺流程简单，生产成本低，再生根健壮，可为高产、速生、高抗橡胶树单株树根再生及组织培养优良砧木提供材料。