本发明涉及一种金边弧叶龙舌兰离体培养及再生体系建立的方法，包括以下步骤：（1）无菌苗培养：以珠芽苗茎尖为外植体，消毒后接种于丛芽诱导培养基上诱导无菌苗；（2）愈伤组织诱导：以无菌苗茎尖为外植体，纵切后接种在愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导；（3）愈伤组织继代培养：将诱导的愈伤组织转入继代培养基中进行愈伤组织继代培养；（4）不定芽诱导及植株再生：将继代培养获得的块状或球状愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上进行不定芽诱导和植株再生；（5）继代培养和生根：将再生植株转入继代培养基中进行继代培养，成苗后生根；（6）再生植株移栽；本方法简单，为金边弧叶龙舌兰的离体快繁和遗传改良打下了良好的基础。