本发明公开了一种米老排成年优良单株的离体植株再生方法，属于植物的组织培养技术领域。该方法通过基本培养基设置、不同激素成份及浓度水平配比优化，以成年优株基部萌枝为外植体，经腋芽诱导、腋芽增殖和生根培养，形成完整植株，移栽到基质后，得到生长整齐、表型一致的健壮苗木；造林成活率高，林相整齐。本发明克服了米老排外植体无菌性建立时污染率高、增殖培养时芽伸长生长慢、增殖倍率低、生根率低等问题，可进行规模化快速育苗，生产出健壮、整齐一致的米老排幼苗，生产成本低，为实现米老排优良单株的无性化推广，为提高米老排人工林的经济效益提供技术支撑和良种保障，应用前景广阔。