本发明公开了一种油用牡丹组织培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、建立无菌培养环境；选条：选取生长健壮的当年生油用牡丹枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体；配置培养基：包括分化培养基和生根培养基；清洗外植体；消毒与接种；培养无菌芽；S2、继代增殖S21、将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到分化培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，将原茎段去除；继代增殖培养基每升用蔗糖25-27克；S22、每28-49天重复做一次继代增殖，继代前先制备好生根培养基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一段，投入新鲜的增殖培养基上；S23、生根与移栽。