本发明公开了一种铁皮石斛茎段组培快繁方法，属于生物技术领域。该方法以为1年以上生长期的铁皮石斛离根部三节以上的茎段为外植体材料进行组培快繁，包括以下步骤：茎段外植体的准备、消毒、诱导培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、光培炼苗。本发明具有取材容易、材料量大、不受季节限制优点，能较好的保持母本的生物学性状，培养技术简单易行，污染率低，繁殖速度快，对濒危紧缺药用植物资源再生和持续利用具有重要意义。