本发明公开了一种农杆菌介导的甘监型油菜遗传转化方法，包括以下步骤：取甘蓝型油菜幼苗的下胚轴，以下胚轴的下端为外植体进行预培养，诱导产生愈伤组织；利用携带目的基因的农杆菌侵染愈伤化的外植体，然后进行共培养；共培养后的外植体在含选择剂的分化培养基上诱导生成抗性不定芽；进行生根培养，获得抗性苗。本发明因以甘蓝型油菜下胚轴的下端为外植体，且使用了最适于甘蓝型油菜遗传转化的生长条件，特别是共培养基中的pH值和两种高低浓度草甘膦分化筛选方式，成功获得了抗草甘膦的转基因植株，并与现有技术相比具有更高的抗性苗分化率，建立了一个高效的抗草甘膦的甘蓝型油菜再生体系，为研究甘蓝型油菜农杆菌介导的转基因技术奠定基础。