本发明公开了一种短葶山麦冬组织培养方法，涉及短葶山麦冬（Liriope muscari ）通过植物组织培养技术短时间内快速获得大量短葶山麦冬优良品种试管苗的方法。本发明以短葶山麦冬茎尖为外植体，经过外植体消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗及移栽等过程有效地提高了芽的诱导率、继代系数及生根率，进而建立了完整的短葶山麦冬组织培养体系，以便进行短葶山麦冬种苗工厂化生产。