本发明公开了一种牛大力毛状根诱导及增殖的组织培养方法。本方法以牛大力子叶为外植体进行诱导毛状根，方法包括外植体灭菌，农杆菌活化培养，毛状根诱导培养、增殖培养等环节。本发明的优点：(1)采用牛大力子叶为外植体进行转化；(2)确立了适合牛大力毛状根诱导的预培养时间、菌液浓度、侵染时间及共培养时间；(3)确定了外植体抑菌培养最佳的抑菌剂；(4)确定了最佳的预培养、共培养、抑菌培养及继代增殖培养基；(5)本发明提供的整套方法操作简便，生产成本低，诱导成功率高，增殖速度快，可持续获得牛大力毛状根，用于规模化培养牛大力毛状根以提取牛大力多糖等主要化学成分，具有很好的应用前景。