本发明涉及一种翅柄铁线蕨的繁育方法，所述的方法包括：1)外植体的选取，2)外植体消毒，3)初始诱导培养，4)愈伤组织诱导，5)增殖培养，6)生根培养，7)炼苗和移栽。采用本方法繁育翅柄铁线蕨，可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。