本发明涉及一种以胚芽鞘节作为外植体的玉米再生体系的建立方法，属于农业生物技术和作物育种领域。主要包括以下步骤：（1）将灭菌的玉米种子置于发芽培养基中培养，萌发获得幼苗；（2）从幼苗上切取胚芽鞘节诱导愈伤组织；（3）对愈伤组织进行继代扩繁；（4）对愈伤组织进行胚状体诱导；（5）对胚状体进行分化成苗。本方法取材不受季节限制、扩繁效率高，可应用于玉米大规模遗传转化和单倍体材料的扩繁。