本发明公开了以花椰菜小孢子胚为外植体建立高效再生体系的方法，属于植物组织培养技术领域。包括培养基的配制和花椰菜小孢子胚再生植株培养等两大步骤。本发明以小孢子胚为外植体，其芽诱导率高达100%，每外植体芽数达30-50个；培养基添加玉米素0.5-1.0mg/L后，芽诱导率和诱导数比对照分别提高1.1倍和3.2倍；添加4.0-5.0mg/LAgNO₃后褐化率比对照降低10%左右。该方法既大幅度提高了花椰菜组培的效率，并为提高其遗传转化率提供了新的技术途径。本发明可在花椰菜组培及基因工程遗传改良中推广应用。