本发明公开一种氯代烃好氧降解混合菌剂及其制备方法与应用，包括混合降解菌剂的筛选和驯化、混合降解菌剂的制备方法和混合降解菌剂的应用。本发明设定在葡萄糖共代谢条件下，30℃、pH7、摇床转速180rpm时，混合菌剂对氯代烃的降解效果最佳，降解率达68.1%。同时研究了混合降解菌剂与植物联合对TCE的修复技术。本发明筛选出三氯乙烯的好氧混合降解菌剂，提供了一种混合菌剂的富集培养方法，并利用这些微生物与植物联合降解水或土壤中的氯代烃污染物，对有机物污染的修复具有高效、经济、无二次污染的特点；修复地下水范围宽，可去除的污染物种类多，应用广泛。