本发明涉及一种微生物固态培养基无菌粉碎方法，包括如下步骤：施力于盛放有微生物固态培养基的容器，使容器按预定轨迹作往复运动并使容器内的固态培养基形成与容器运动轨迹相反的往复运动料流。本发明的微生物固态培养基粉碎方法，具有无污染、粉碎过程对微生物损伤小、培养基利用率高等优点；本发明的粉碎方法可根据需要选择不同时间、强度和运动轨迹，能够满足各类微生物固态培养需求。本发明的微生物固态培养基的培养方法，在培养过程中，对固态培养基间歇性地采用本发明的粉碎方法进行粉碎，相对于传统固态培养技术，可以显著提高微生物培养质量及效率，适合在生物制药、食品发酵、生化实验等领域大规模应用。