一种制备抗肿瘤药物牛蒡根提取物的方法，牛蒡的研究目前主要集中在牛蒡子部位，本发明的目的在于，研究开发牛蒡根中具有生物活性的有效成分和有效部位，制成有效制剂，其另一个目的在于利用现代提取分离手段寻找到最佳的制备制剂的方法，将中药材牛蒡根粉碎后，用95%乙醇提取，浓缩成浸膏，加水混悬，再用石油醚和氯仿萃取后，将获得的石油醚（60-90℃）部分和氯仿部分，再经柱层析分离获得石-1、石-2、石-3和氯-1、氯-2、氯-3、氯-4等有效部位，经体外抗肿瘤活性测试，氯-1和氯-2具有较强的细胞毒活性，可以采用制药的方法制备成口服抗癌制剂。