本发明涉及动物诊断医学,特别涉及牛肺炎支原体的诊断技术,具体为多表位融合抗原,含有如SEQ ID NO:1所示,或氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;其在制备牛肺炎支原体诊断试剂中的应用;该诊断试剂可作为间接ELISA试剂盒的固相载体包被抗原,与之特异性抗体结合后,并加入辣根过氧化物酶偶联的抗-牛IgG抗体进行孵育,产生显色反应,显色程度与待测样本中抗牛肺炎支原体抗体的量成正比;本方法操作简便,无需依靠复杂的仪器设备,对实验室条件、以及实验人员的技术要求不高,检测成本相对较低,适合于基层和养殖场大规模开展;本多表位融合抗原制作成本低,适合大规模应用;灵敏度和特异性高,批间差异小,采用多表位作为标靶,其检测结果一致性高。