本发明涉及一种汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途。所述提取方法包括如下步骤：(1)将原料进行水洗；(2)干燥、剪碎；(3)有机溶剂提取；(4)减压浓缩，得初提物浸膏；(5)将初提物浸膏进行使用无机物溶液与有机溶剂的液液萃取，得到浸膏；(6)将浸膏装入硅胶层析柱中，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。该提取物具有优异的广谱抗菌效果，可作为天然的抗菌整理剂而应用于纺织品的抗菌整理等过程中。本发明的所述提取物、提取方法及其用途具有十分广泛的工业应用价值和市场前景。