本发明公开一种用于黄颡鱼及乌鳢超雄鱼及全雄鱼开发的后裔测定方法，包括如下步骤：(1)黄颡鱼、乌鳢的激素控制性别；(2)测交筛选伪雄性；(3)全雌性群体及伪雌性群体获得；(4)利用伪雄性测交筛选伪雌性；(5)利用全雌性种群测交筛选YY雄性及雌性构建超雄系。与现有技术相比，本发明提供的用于黄颡鱼及乌鳢超雄鱼及全雄鱼开发的后裔测定方法，操作简单，效率高，育种风险低，克服了传统上开发XX-XY基因型养殖动物全雄苗种的不确定性，能够显著提高测交效率，减少统计困难。