本发明涉及一种烟苗接种喷雾施肥一体机及其作业方法，采用的技术方案：包括机架、微创机构、喷洒装置、气流辅助机构和行走机构。所述的机架用于固定、支撑喷洒装置和其他机构；所述的微创机构用于微创烟草幼叶；所述的喷洒装置用于喷洒疫苗接种液、喷洒农药或叶面肥；所述的气流辅助机构用于将叶片吹向微创机构，或用于翻动叶片辅助喷雾；所述的行走机构用于驱动机械支架在烟苗育苗区行进。本发明针对烟苗接种机械缺乏、现有植保机械低效的问题,采用旋转的附有耐水砂纸的滚筒对烟草幼叶进行微创，加之辅助气流，喷洒疫苗接种液进行接种，提高烟苗接种率，并可实现精准喷药或精准喷施叶面肥等多种复合功能，可适应不同种植情况的烟草接种和喷雾施肥，实现温室烟草综合管理。