本发明涉及负载金纳米簇和抗癌药物的脂质体温度荧光探针的制备方法，该方法具体包括以下步骤：1)以二硫辛酸为保护剂，氯金酸为原料，硼氢化钠为还原剂，采用微波热解法水相制备出近红外发射的荧光金纳米簇；2)用氯仿与甲醇的混合溶剂溶解卵磷脂和胆固醇，旋转蒸发溶剂制得薄层磷脂干膜，然后用金纳米簇悬浊液和抗癌药物水溶液溶解，采用超临界二氧化碳法孵化，制备出内水相负载金纳米簇和抗癌药物的脂质体悬浊液。与现有技术相比，本发明方法简单，成本较低，制备的脂质体药物载体具有光致热敏性，荧光强度的温敏性，可发展成一种新颖的基于脂质体药物载体的温度荧光探针，对于其它药物载体的制备及应用都具有十分重要的参考价值。