本发明涉及一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法。本发明的技术方案是将采集的鲜天麻洗净后用微波法杀青、加水磨浆、浆液采用单一或复合酶酶解，酶解液过滤后，超滤膜超滤，收集分子切割量20KDa以上,150KDa以下的组分，冷冻干燥，得到天麻多糖。采用酶法辅助超滤膜超滤提取天麻多糖，对多糖结构破坏小，既提高了多糖的得率，又提高了多糖的纯度，还保持多糖的活性。通过本方法制备的天麻多糖是除去蛋白后的纯多糖，具有生产工艺合理、简单，易于工业化生产的特点，生产的天麻多糖可以广泛的应用于各种保健食品及药品中。