本发明公开了一种制备高纯度姬松茸多糖的方法，而提供一种所得姬松茸多糖的含量高，适合规模化生产的方法。姬松茸粉加入纤维素酶与果胶酶，加水搅拌均匀后，pH值调至6.0±0.1，酶解40分钟；进行微波提取，姬松茸水提液冷冻干燥得到浓缩产物；采用大孔吸附树脂，对姬松茸粗多糖提取物溶液进行脱色和初步除杂处理；之后采用离子交换树脂进行脱蛋白处理；用超滤技术对脱蛋白后的姬松茸粗多糖进一步纯化，排除小分子水溶性物质的存在；将上述姬松茸粗多糖超滤液预冻至-60℃，维持至少4h，在-45℃进行真空干燥得到姬松茸多糖。该方法应用微波协同复合酶法、树脂脱蛋白技术、超滤工艺纯化和冷冻干燥技术相结合,姬松茸多糖纯度达到90%。